PRODUÇÃO IN VITRO DE EMBRIÕES UTILIZANDO-SE SÊMEN SEXADO DE TOUROS 5/8 GIROLANDO

Pábola Santos Nascimento; Maiana Silva Chaves; Antônio Santana dos Santos Filho; Sebastião Inocêncio Guido; Maria Madalena Pessoa Guerra; Cláudio Coutinho Bartolomeu

doi:10.1590/cab.v16i3.32156

Authors

Pábola Santos Nascimento Universidade Federal Rural de Pernambuco- Unidade Acadêmica de Garanhuns
Maiana Silva Chaves Universidade Federal Rural de Pernambuco- Unidade Acadêmica de Garanhuns
Antônio Santana dos Santos Filho Instituto Agronômico de Pernanbuco
Sebastião Inocêncio Guido Instituto Agronômico de Pernambuco
Maria Madalena Pessoa Guerra Universidade Federal Rural de Pernambuco
Cláudio Coutinho Bartolomeu UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNANBUCO

DOI:

https://doi.org/10.1590/cab.v16i3.32156

Keywords:

Animal Reproduction

Abstract

We evaluated the "in vitro" blastocyst rate production using bovine sexed semen. Semen from three bulls was used to verify the individual's semen variation, cleavage rates and embryo production. In this study, we employed reproductive biotechnologies, computer analysis of post-thawed semen and fluorescent probes for sperm cells integrity analysis (plasma membrane, acrosome membrane and mitochondrial potential). A total of 959 oocysts went through in vitro maturation steps for in vitro fertilization and cultivation, being 473 with sexed semen and 486 with conventional semen. The cleavage rate was observed in blastocysts on D2 and D7. Data were analyzed by SPSS 16.0 software using analysis of variance (ANOVA), Student's t-test was used to detect differences between groups, and chi-square analysis for in vitro production results (P <0.05 ). The results differed between conventional (31.06%) and sexed semen (21.10%) in the obtainment of blastocyst. When the blastocyst production was individually compared in sexed semen samples (27.69%, 17.93% and 25.56%, bulls 1, 2 and 3, respectively) we verified T2 <T1 and T1 = T3 and T2 = T3. As for sperm kinetic analyzes, the sexed semen samples showed differences among bulls in curvilinear speed, linear speed and path velocity variables where T1 (117.7 ± 1.6 µm/s; 60.0 ± 0.3 µm/s, 73.6 ± 0.4 µm/s, respectively) showed the highest values when compared to T2 bulls (80.2 ± 2.3 µm/s, 47.0 ± 2.0 µm/s, 57.7 ± 0, 9 µm/s, respectively) and T3 (86.4 ± 5.7 µm/s, 46.2 ± 2.7 µm/s, 53.8 ± 2.8 µm/s, respectively). Analyses of sperm cell integrity did not differ among conventional semen samples, but in the sexed semen, membrane integrity was the variable that differ statistically among bulls once T1 (38 ± 2.7) differed from T3 (53 8 ± 1.8) (P = 0.009) but did not differ from T2 (44.1 ± 4.4). It is possible to conclude that sexed semen was less efficient in blastocyst production when compared with conventional semen. Analyses of kinetic and integrity were consistent with the fertilization potential of semen samples from 5/8 Girolando bulls.

Keywords: bovine, CASA, FIV.

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Author Biographies

Pábola Santos Nascimento, Universidade Federal Rural de Pernambuco- Unidade Acadêmica de Garanhuns

Graduada no Curso de Medicina Veterinária da Faculdade Pio Décimo (2007-2011). Mestre em Sanidade e Reprodução de Ruminantes pela Universidade Federal Rural de Pernambuco, na Unidade Acadêmica de Garanhuns (2012-2014). Atua principalmente no desenvolvimento de pesquisas na área de Reprodução animal.

Maiana Silva Chaves, Universidade Federal Rural de Pernambuco- Unidade Acadêmica de Garanhuns

Mestranda do curso de pós graduação em Sanidade e Reprodução de Ruminantes

Antônio Santana dos Santos Filho, Instituto Agronômico de Pernanbuco

Possui graduação em Medicina Veterinária pela Universidade Federal Rural de Pernambuco (1985), mestrado em Ciência Veterinária pela Universidade Federal Rural de Pernambuco (1998) e doutorado em Ciência Veterinária pela Universidade Federal Rural de Pernambuco (maio de 2004). Atualmente é pesquisador da Empresa Pernambucana de Pesquisa Agropecuária, colaborador da Fundação de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco e financiamento de pesquisa da Fundação de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco. Tem experiência na área de Reprodução Animal, com ênfase em Transferência de Embriões, atuando principalmente nos seguintes temas: embrião, dinâmica folicular,anestro pós-parto, superovulação e girolando

Sebastião Inocêncio Guido, Instituto Agronômico de Pernambuco

Médico Veterinário, graduado pela Universidade Federal Rural de Pernambuco - UFRPE em 1996, com mestrado em Reprodução Animal (1999) e doutorado em Ciência Veterinária (2005), também pela UFRPE. Pesquisador do Instituto Agronômico de Pernambuco - IPA. Atuação na área de Reprodução Animal, com ênfase em Reprodução Assistida de Ruminantes, principalmente nos seguintes temas: ginecologia, manejo reprodutivo de gado leiteiro, inseminação artificial, transferência de embriões, produção in vitro de embriões, tecnologia de sêmen e ultrassonografia.

Maria Madalena Pessoa Guerra, Universidade Federal Rural de Pernambuco

Possui graduação em Medicina Veterinária pela Universidade Federal Rural de Pernambuco (1982), mestrado em Medicina Veterinária pela Universidade Federal Rural de Pernambuco (1992), doutorado em Ciência Animal pela Escola de Veterinária-UFMG (1998), especialização em Reprodução Animal pelo INIA-Madri (1999) e pós-doutorado na Universidade de Sidney-Austrália (2004). Professora Associado 4 da Universidade Federal Rural de Pernambuco, ministrando a disciplina Andrologia e Biotecnologia da Reprodução no curso de Medicina Veterinária. Professora e orientadora nos Programas de Pós-graduação "Ciência Animal Tropical" e "Sanidade e Reprodução de Ruminantes" da UFRPE. Representante do curso de doutorado em Biotecnologia da RENORBIO no Estado de Pernambuco (2006-2012). Professora e orientadora no curso de doutorado em Biotecnologia da RENORBIO. Consultora Ad Hoc das revistas Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, Ciência Veterinária nos Trópicos, Ciência Rural, Ciência Animal, Human and experimental toxicology, Reproductive Biology e Animal Reproduction Science. Foi Membro do Conselho Fiscal e Representante Estadual do Colégio Brasileiro de Reprodução Animal no período de 2005-2007. Coordenadora da área de Medicina Veterinária na CAPES no triênio 2011-2013. Pró-Reitora de Pesquisa e Pós-graduação da UFRPE desde julho de 2013. Tem experiência na área de Medicina Veterinária, com ênfase em Andrologia e Biotecnologia da Reprodução Animal, atuando principalmente nos seguintes temas: sêmen, avaliação, sexagem e criopreservação.

Cláudio Coutinho Bartolomeu, UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNANBUCO

CLAUDIO COUTINHO BARTOLOMEU CONCLUIU O DOUTORADO EM REPRODUCAO ANIMAL PELA UNIVERSIDADE DE SAO PAULO EM 2003. ATUALMENTE E PROFESSOR ADJUNTO DA UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNANBUCO - CAMPUS RECIFE. PUBLICOU ARTIGOS EM PERIODICOS ESPECIALIZADOS E TRABALHOS EM ANAIS DE EVENTOS. PARTICIPOU DO DESENVOLVIMENTO DE 5 PRODUTOS TECNOLOGICOS. PARTICIPOU DE 21 EVENTOS NO BRASIL. ORIENTOU TRABALHOS DE CONCLUSAO DE CURSO NA AREA DE MEDICINA VETERINARIA. ATUA NA AREA DE MEDICINA VETERINARIA, COM ENFASE EM FISIOPATOLOGIA DA REPRODUCAO ANIMAL, ATUALMENTE VEM DESENVOLVENDO JUNTO AO DEPARTAMENTO DE MEDICINA VETERINÁRIA ATENDIMENTO NA ÁREA DE OBSTETRÍCIA VETERINÁRIA, INCLUINDO CIRURGIAS OBSTÉTRICAS. EM SUAS ATIVIDADES PROFISSIONAIS INTERAGIU COM 80 COLABORADORES EM CO-AUTORIAS DE TRABALHOS CIENTIFICOS.