DESENVOLVIMENTO E PADRONIZAÇÃO DE UM ELISA INDIRETO PARA DIAGNÓSTICO DE MAEDI VISNA EM OVINOS

Autores

  • Tânia Valeska Medeiros Dantas UECE
  • Suzana Aparecida Costa de Araújo UECE
  • Raymundo Rizaldo Pinheiro CNPC/EMBRAPA
  • Maria Alzira do Carmo Aragão UECE
  • Jean Berg Alves da Silva UECE
  • Aracely Rafaelle Fernandes Ricarte UECE
  • Adriana Lopes Ribeiro UECE
  • Maria Fátima da Silva Teixeira UECE

Palavras-chave:

Medicina Veterinária Preventiva

Resumo

O objetivo deste trabalho foi desenvolver e padronizar um ELISA indireto para diagnóstico de Maedi Visna (MV). Produziu-se o antígeno em sobrenadantes de cultivo celular de membrana sinovial caprina (MSC) inoculado com o Maedi Visna Vírus (MVV) cepa K1514, que passou por ciclos de congelamento e descongelamento, sendo logo após clarificado por centrifugação a 3.000 g por 40 minutos A suspensão clarificada foi precipitada por PEG 8000, centrifugada a 12.000 g por 60 minutos, o pellet ressuspendido em TNE (Tampão Tris-HCl, NaCl, EDTA) e ultracentrifugado a 42.000 g por 105 minutos em colchão de sacarose, e ressuspendido em PBS contendo phenylmethylsulphonyl fluoride (PMSF). Realizou-se o ELISA em microplacas de 96 poços, incubadas por 1h a 37 ºC, utilizando-se como revelador o-phenylenediamine (OPD). Para a comparação entre os testes de ELISA e AGID, utilizaram-se 175 amostras de soros. A concentração ótima do antígeno foi a de 2 µg/mL e a melhor diluição dos soros, controles e testes de 1:100. O ELISA detectou um maior número de positivos (40) que o AGID (11), apresentando uma sensibilidade de 91%, especificidade de 82%. O ELISA promoveu uma melhor sensibilidade que o AGID. Embora sua especificidade tenha ficado abaixo do esperado, seu uso pode ser indicado como teste de diagnóstico de MVV.PALAVRAS-CHAVES: Diagnóstico sorológico, ELISA, lentivírus ovino, MaediVisna.

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Publicado

2008-04-03

Como Citar

DANTAS, T. V. M.; ARAÚJO, S. A. C. de; PINHEIRO, R. R.; ARAGÃO, M. A. do C.; SILVA, J. B. A. da; RICARTE, A. R. F.; RIBEIRO, A. L.; TEIXEIRA, M. F. da S. DESENVOLVIMENTO E PADRONIZAÇÃO DE UM ELISA INDIRETO PARA DIAGNÓSTICO DE MAEDI VISNA EM OVINOS. Ciência Animal Brasileira / Brazilian Animal Science, Goiânia, v. 9, n. 1, p. 181–187, 2008. Disponível em: https://revistas.ufg.br/vet/article/view/3677. Acesso em: 17 ago. 2022.

Edição

Seção

Medicina Veterinária