EFEITOS DO PERÍODO PUERPERAL SOBRE
O HEMOGRAMA E TESTE DE NBT
Marcos
Roberto A. Ferreira1, Tamires Soares de
Assis1, Nívea Caroline M. Silva1, Cecília Nunes Moreira2
1- Alunos (as) do Curso de Medicina Veterinária da
Universidade Federal de Goiás – CAJ.
2- Professor Adjunto do Curso de Medicina
Veterinária, CAJ/UFG, Jataí, Goiás, Brasil.
CEP:75800-000. E-mail: cissanm@yahoo.com.br (autor correspondente)
PALAVRAS-CHAVE:
Neutrófilos, metabolismo oxidativo, parto.
ABSTRACT
This study investigates the relationship between hematological
parameters and neutrophil functional activity, evaluated by the NBT method, in
pregnant Girolanda cows raised in Brazil. This work was carried out at the
dairy farm Fazenda Santa Rosa at Universidade Federal de Goiás, Jataí Campus,
southwest of Goiânia, Goiás State. Hemogram results revealed that the number of
prepartum leukocytosis was higher than postpartum ones, although they were not
characterized as leucopenia due to stress on leukocyte count during
parturition. Assessment of neutrophils oxidative metabolism showed that
reduction in the number of neutrophils in the postpartum period may be
justified by stress.
KEYWORDS: Neutrophils, oxidative metabolism, parturition.
INTRODUÇÃO
A hematologia no meio semiológico vem acrescentar à Medicina
Veterinária extraordinário auxílio para se estabelecer diagnósticos e acompanhar
os tratamentos de inúmeras enfermidades que atingem os animais. Entretanto, é fundamental
o conhecimento dos valores de referência do hemograma dos animais sadios. Os fatores
ambientais exercem influência sobre o quadro hematológico desses, havendo uma
concordância que animais criados sob diferentes condições ambientais podem
apresentar variações no hemograma (SAUT & BIRGEL JUNIOR, 2006).
A
ativação do eixo hipotálamo-hipófise-adrenal, pelo estresse, gera uma cascata
hormonal que culmina com o aumento nas concentrações de cortisol plasmático. No
final da gestação o número de eritrócitos aumenta em conseqüência do efeito
eritropoiético da somatotropina coriônica placentária e da progesterona (LONGO,
1983). As alterações no leucograma de bovinos durante o parto são típicas de
uma resposta leucocitária a um quadro de estresse (ESIEVO & MOORE, 1979). O
número de leucócitos totais encontra-se aumentado, principalmente devido ao
aumento de neutrófilos, com ou sem desvio à esquerda.
O
número de cada tipo de leucócito varia, dependendo do grau de estresse e da
condição das membranas fetais. Estas alterações são evidentes entre as 12 e 24
horas após o parto e diminuem nos dias subseqüentes. O aumento da produção de
substâncias oxidativas no interior do neutrófilo é fundamental para a
eficiência deste processo de defesa (TIZARD, 2000). O teste da redução do
nitroblue tetrazolium (NBT) foi um método desenvolvido para a determinação
desta atividade oxidativa dos neutrófilos (BAEHNER & NATHAN, 1968; BIRGEL
JUNIOR & SAUT, 2004).
O objetivo deste trabalho foi determinar os efeitos do
período puerperal sobre o hemograma e o metabolismo oxidativo dos neutrófilos
(NBT) de vacas da raça Girolando.
MATERIAL E MÉTODOS
O presente trabalho foi conduzido na propriedade rural
Fazenda Santa Rosa, da Universidade Federal de Goiás – Campus Jataí, situada na
região Sudoeste do Estado de Goiás, no município de Jataí. Foram coletadas
amostras de sangue de 11 vacas girolando, 7 dias antes do parto e 24hs após o
parto. A colheita foi realizada por punção da veia jugular utilizando tubos vacutainer com anticoagulante EDTA a 10%
obtendo 5mL de sangue, para a determinação do volume globular (COLES, 1984),
proteína total por refratometria, fibrinogênio plasmático pela técnica de
precipitação no tubo de micro hematócrito a 56oC, contagem total de
hemácias e de leucócitos com utilização de câmara de Newbauer e dosagem de
hemoglobina pelo método de cianometahemoglobina por espectrofotometria (JAIN, 1993).
Para a determinação do teste de redução do nitroblue
tetrazolium (NBT), foram obtidos 500 μL de sangue em tubos eppendorf® contendo
2,0 μL de heparina (Roche, São Paulo, Brasil). A avaliação do metabolismo
oxidativo dos neutrófilos foram utilizados os testes NBT pelo método estimulado
e não estimulado. Os testes NBT foram realizados pelo método citoquímico
descrito por PARK et al. (1968). Desta solução de NBT foram pipetados e
transferidos 50μL para frascos plásticos de 1000 μL (Stimulant, USA). Após
homogeneização foram pipetados 50μL de sangue heparinizado, misturando-se as
amostras com os reagentes, foram incubados a
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Na avaliação hematológica antes do parto, obteve-se os
seguintes valores na série vermelha: hematócrito (32,4% ± 6,4%), hemácias (6,2
mm³ ± 0,61 mm³), fibrinogênio (525 g/dL ± 320 g/dL), proteínas plasmáticas
(8,7g/dL ± 0,68g/dL), VCM (52,8 fl ± 5,9 fl), CHCM (33,3 g% ± 0,61g%) e , plaquetas,
(316.625 mm³ ± 188.348 mm³). Quanto ao eritrograma, no período pré-parto, 9,09% (1/11) das vacas apresentaram anemia,
sendo que 100% foi do tipo normocítica e normocrômica, 45,45% (5/11) dos
animais apresentaram trombocitopenia e 54,54% (6/11) contagem de plaquetas
normais. Em relação às proteínas plasmáticas totais, 54,45% (6/11) apresentaram
hiperproteinemia, enquanto 45,45% (5/11) tinham índices normais de proteínas.
Passando
à análise da série branca, os valores médios obtidos foram: leucócitos totais
(15.675 mm³ ± 5.715 mm³). No leucograma diferencial, os linfócitos (9.640 mm³ ±
6.104 mm³), segmentados (10.238 mm³ ± 11.620 mm³), bastonetes (402 mm³ ± 727
mm³). Com relação ao leucograma, no período pré-parto, 54,55% (6/11) dos
animais apresentaram leucocitose e 45,45% (5/11) contagem de leucócitos
normais; dos linfócitos, 45,45% (5/11) mostraram linfócitos normais e 54,55%
(6/11) linfocitose. Em relação à contagem de neutrófilos totais, 54,55% (6/11)
resultaram em contagem normal e 45,45% (5/11) neutrofilia. Na contagem dos
monócitos, 36,36% (4/11) apresentaram monocitose e 63,64% (7/11) contagem de
monócitos normais. Evidenciou-se que 63,64% (7/11) apresentaram eosinofilia e
36,36% (4/11) contagem normal de eosinófilos.
Na
avaliação hematológica após o parto, obtiveram-se os seguintes valores na série
vermelha: hematócrito (33% ± 5,6%), hemácias (6,2 mm³ ± 0,60 mm³), fibrinogênio
(2.188 g/dL ± 4.000 g/dL), proteínas plasmática (8,3 g/dL ± 0,66 g/dL), VCM
(53,4 fl ± 4,16 fl), CHCM (33,3 g% ± 0,42 g%) e , plaquetas, (362.286 mm³ ±
167.305 mm³). Quanto ao eritrograma pós-parto, 100% (11/11) das vacas
apresentaram-se sem alterações, 27,27% (2/11) apresentaram trombocitopenia e
72,73% (8/11) contagem de plaquetas normais. Em relação às proteínas plasmáticas
totais, 45,45% (5/11) apresentaram hiperproteinemia, enquanto 54,55% (6/11)
apresentaram índices normais de proteínas.
No
que se refere à serie branca, leucócitos totais (13.594 mm³ ± 3.108 mm³), no
leucograma diferencial, os linfócitos (8.051 mm³ ± 3.360 mm³), segmentados
(3.991 mm³ ± 2.357 mm³), bastonetes (14 mm³ ± 39 mm³). Quanto ao leucograma
pós-parto, 45,45% (5/11) dos animais apresentaram leucocitose, 54,55% (6/11)
contagem de leucócitos normais. Quanto aos linfócitos, 36,36% (4/11) apresentaram
linfopenia e 63,64% (7/11) contagem de linfócitos normais. Já na contagem de
neutrófilos totais, 72,73% apresentaram contagem normal e 27,27%
neutrofilia. Na contagem dos monócitos,
36,36% (4/11) apresentaram diminuição de monócitos e 63,64% (7/11) estavam
normais. Evidenciou-se que 9,09% (1/11) apresentaram eosinofilia, enquanto
90,91% (10/11) apresentaram índice normal de eosinófilos.
Quanto
ao NBT os valores médios antes do parto foram (47% ± 0,17%), e depois do parto
foram (32% ± 0,17%); sendo que 54,55%(6/11) das vacas apresentaram
significativo decréscimo na porcentagem do NBT pós-parto em relação à
porcentagem do NBT pré-parto e 45,45% (5/11) das vacas tiveram um aumento na
porcentagem.
Com estes resultados, verifica-se que a maioria dos
animais demonstrou leucocitose pré-parto, concordando com EISIEVO & MOORE (1979).
Já no pós-parto houve um decréscimo significativo nos valores leucocitários, porém
dentro dos valores referenciais segundo (MEYER et al., 1995), não caracterizando
uma leucopenia, justificado por um estresse puerperal, discordando com AIELLO E
MAYS (2001).
Não foram encontradas fontes seguras que nos fornecesse
informações sobre a atuação do teste de NBT em vacas no pré e pós-parto. Os
resultados encontrados nesse trabalho foram um decréscimo na porcentagem de NBT
nos testes realizados no pós-parto provavelmente justificado pelo estresse
puerperal.
CONCLUSÕES
Foi observado
neste estudo que as vacas Girolando no período peri-parto apresentam seu
sistema imunológico deficiente, visto a redução na capacidade de oxidação dos
neutrófilos nas primeiras 24 horas após o parto, o que significa, que neste
período estes animais podem se tornar mais susceptíveis as diversas
enfermidades infecciosas como mastite e metrite, sendo o manejo preventivo
essencial para o sucesso da pecuária leiteira e o bem estar dos animais.
REFERÊNCIAS
BAEHNER,
R. L.; NATHAN, D. G. Chronic granulomatous disease.
BIRGEL JUNIOR, E. H.; SAUT, J. P.
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holandesa. Brazilian Journal Veterinary
Research Animal Science,
COLES,
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São Paulo: Manole, 1984, 566p.
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FRASER, C. M.; BERGERON, J. A.; MAYS, A.; AIELLO, S. E. Manual Merk de veterinária. 7.ed. São
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LONGO,
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MEYER,
J. D.; COLES, H. E; RICH, J. L. Medicina
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1995.
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TIZARD, I. R. Veterinary immunology: an introduction. 6.ed. London:
Saunders Company, 2000, 482p