23-v11n35733

The activity of the insecticide thiamethoxam on populations of Musca domestica was assessed through in vitro tests, controlled environment and field conditions. The flies were gathered from a colony maintained by the Laboratory of Parasitic Diseases, Department of Epidemiology and Public Health, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, and from the landfill of the city of Seropédica-RJ, Brazil. Regarding the in vitro assay, thiamethoxan was previously diluted in acetone, resulting in concentrations of 5, 7.5, 10, 12.5, 15, 17.5, 20, 22.5, 25, 27, 5 and 30 mg/ml. Then, filter paper discs were impregnated with 1 ml of each of these dilutions. Thus, the test was conducted with adult flies maintained in Petri dishes. For the controlled environment and field conditions, trial baits were used with the active or a placebo (control group). The lethal concentration 50 (LC50) of thiamethoxam on M. domestica found in the in vitro assay was 0.2612 mg / cm ². The efficacy of thiamethoxan baits on the controlled environment and field conditions trials was 94.06 % and 98.09 %, respectively.

KEYWORDS: Baits, Musca domestica, neonicotinoids, thiamethoxam.

INTRODUÇÃO

A espécie Musca domestica (Linnaeus, 1758), conhecida mundialmente como mosca doméstica, é um inseto cosmopolita e está em associação muito estreita com o homem e seu alimento, bebidas e lixo. Pelo seu hábito de regurgitar e depositar suas fezes no alimento, ela está relacionada com a transmissão de diversas doenças (HEWITT, 1914). Dentre elas são citados, na literatura, a febre tifoide, o cólera, o tracoma, lepra, conjutivites, o vírus da poliomielite, protozooses tais como Giardia duodenalis e Entamoeba coli (FREITAS et al., 1978; FOEDAR, 2001). Atua também como hospedeiro intermediário de alguns endoparasitos como Habronema muscae e Draschia megastoma nos equinos (COLLOBERT-LAUGIER, 2000), Raillietina sp. nas aves (HORSFALL, 1938) e como vetor forético de ovos de Dermatobia hominis (RIBEIRO, 1985).
Em função de sua importância, diversas medidas de controle têm sido implantadas, sendo o controle químico, através de formulações de inseticidas, o mais utilizado (NEVES & NOGUEIRA, 1996). O controle nesta espécie constitui um grande problema em saúde pública, principalmente pela elevada resistência aos inseticidas químicos (CHAPMAN et al., 1993).
Os neonicotinoides são amplamente utilizados no controle de pragas de importância na agricultura (KAGABU, 1997). Estes apresentam uma boa atividade contra populações de pragas resistentes a outras classes de inseticidas como os organofosforados, os carbamatos, os piretroides, e muitas outras classes de compostos (NAUEN et al., 2003). Os neonicotinoides recebem essa denominação por se ligarem agonisticamente aos receptores nicotínicos pós-sinápticos de acetilcolina, afetando as sinapses no sistema nervoso central dos insetos (KAGABU, 1997). Eles representam uma classe promissora de inseticidas com excelentes propriedades químicas e biológicas (WAKITA et al., 2005). A segurança e a eficácia dos neonicotinoides têm sido atribuídas, em parte, à alta seletividade desses compostos pelos receptores nicotínicos de acetilcolina dos insetos quando comparados aos dos mamíferos (TOMIZAWA & CASIDA, 2003).
Recentemente, KIRIYAMA (2002) realizou os primeiros estudos com o dinotefuran, em M. domestica, apresentando resultados eficazes no controle químico além de ser uma forma auxiliar para o controle desses insetos resistentes a diferentes grupamentos químicos.
Os estudos envolvendo a ação do tiametoxam sobre M. domestica são escassos. No entanto, KRISTENSEN & JESPERSEN (2008), em seus estudos, obtiveram a dose letal 50 (DL50) do tiametoxam. VAN-HERK et al. (2008), ao empregarem esse inseticida no controle do coleóptero Agriotes obscurus, também obtiveram o valor da DL50.
O presente trabalho teve por objetivo avaliar a eficácia in vitro de diferentes concentrações de tiametoxam no controle de adultos de M. domestica, calcular a dose letal 50 a partir dos resultados obtidos no teste in vitro, e avaliar uma formulação de tiametoxam na apresentação de isca mosquicida em ambiente controlado e em nível de campo.

MATERIAL E MÉTODOS

A manutenção da colônia de M. domestica, o teste in vitro e os testes em ambiente controlados foram realizados no Laboratório de Quimioterapia Experimental em Parasitologia Veterinária (LQEPV), do Departamento de Parasitologia Animal (DPA), Instituto de Veterinária (IV), da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (UFRRJ). Realizaram-se os testes em nível de campo no aterro sanitário do Município de Seropédica, RJ.
Adquiriram-se exemplares de M. domestica no Laboratório de Epidemiologia e Saúde Pública (DESP), (IV) da UFRRJ. As moscas foram mantidas no LQEPV em gaiolas medindo 28,5 cm de altura, 27,5 cm de largura e 32 cm de profundidade. A dieta para a manutenção de adultos foi a base de uma mistura contendo leite em pó e açúcar na proporção de 1:1, disponibilizada no interior da gaiola, além de água, embebida em algodão em placas de Petri, colocada diariamente no interior da gaiola. Como substrato de oviposição e dieta para as larvas utilizou-se uma mistura de ração de coelho e farelo de trigo na proporção de 1:1 umedecidas com água, distribuída em recipientes de plástico e alocada diariamente no interior da gaiola para obtenção de novas posturas. Após 24 horas, os recipientes foram retirados das gaiolas e transferidos para o interior de uma estufa climatizada com demanda bioquímica de oxigênio com temperatura constante de 27 ± 1 ºC e umidade relativa de 80 ± 10 %. Após a emergência dos adultos, colocaram-se os recipientes em novas gaiolas. Repetiu-se esse procedimento até a obtenção da quarta geração (F4), sendo esta selecionada para a realização dos testes.
Como princípio ativo selecionou-se o neonicotinoide tiametoxam. A metodologia empregada para o cálculo da DL50 foi a do resíduo em papel de filtro (SHEPPARD & HINKLE, 1987). Prepararam-se as diluições a partir de 25; 37,5; 50; 62,5; 75; 87,5; 100; 112,5; 125; 137,5 e 150 mg de tiametoxam em 5,0 ml de acetona, com a obtenção das concentrações de 5; 7,5; 10; 12,5; 15; 17,5; 20; 22,5; 25; 27,5 e 30 mg/ml.
Com auxilio de micropipeta de volume fixo, 36 discos de papel-filtro foram impregnados com as diferentes concentrações. Para cada disco, empregou-se um mililitro (1,0 ml) de cada diluente, sendo três repetições para cada concentração. No grupo-controle, impregnaram-se três discos com um mililitro de acetona. Cada disco, com área de aproximadamente 63,585 cm², foi colocado no interior de cada placa de Petri, e, após este procedimento, foram mantidos em temperatura ambiente por um período de 24 horas, para evaporação da acetona. Após esse período, retiraram-se as moscas das gaiolas com auxílio de um aspirador de pó tipo industrial, sendo posteriormente imobilizadas com dióxido de carbono para separação de machos e de fêmeas. Em cada repetição foram colocadas dez moscas, cinco fêmeas e cinco machos, nas placas de Petri com os discos impregnados e, a partir daí, deu-se início ao desafio em ambiente com temperatura e umidade controladas. Os tempos de avaliação da atividade do tiametoxam foram inicialmente de dez e trinta minutos e posteriormente de uma, duas, três, 12, 24, 36 e 48 horas.
Para o cálculo da dose letal 50, foi utilizado o programa Analyst Soft BioStat 2007 – Statistical Analysis Program.
Para avaliar uma formulação de tiametoxam na apresentação de isca mosquicida, foram realizados dois ensaios: um em ambiente controlado e um em nível de campo, seguindo a metodologia proposta pelo Regulamento Técnico para Licenciamento e/ou Renovação de Licença de Produtos Antiparasitários de Uso Veterinário da Portaria nº 48, de 12 de maio de 1997, do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA, 1997).
Para esses ensaios, separaram-se dois gramas de isca mosquicida com tiametoxam a 1 % e dois gramas de isca sem o ativo (placebo) em placas de Petri. Cada placa foi mantida no centro de uma superfície de cor branca (cartolina), com uma área de um metro quadrado.
No teste controlado, através de imobilização por dióxido de carbono, separaram-se e acondicionaram-se duzentas moscas em recipiente provisório até o início do desafio. Em uma sala de alvenaria, com uma área de aproximadamente oito metros quadrados, devidamente telada, foram colocadas as duas superfícies de papel cartolina e, no centro dessas, uma placa com a isca, e em outra a placa com o placebo, com dois metros de distância aproximadamente entre cada placa. Em seguida, as moscas foram soltas na sala, e teve início o ensaio. A cada trinta minutos, realizou-se a contagem do número de moscas mortas na área delimitada tratada e não tratada, e em seguida procedeu-se à troca da posição das superfícies (papel cartolina) com a isca tratada e a com placebo, repetindo-se esse procedimento por quatro vezes. Durante todo o ensaio, mensuraram-se a temperatura e a umidade.
Para a avaliação da isca mosquicida em nível de campo, foi seguida a metodologia descrita anteriormente. O experimento foi realizado no período mais quente do dia, ou seja, por volta do meio-dia, no aterro sanitário situado no Município de Seropédica, RJ, com a população de moscas oriunda do local.
O cálculo da eficácia foi realizado através da seguinte fórmula: [(soma das moscas mortas na área tratada - soma das moscas mortas na área não tratada) / soma das moscas mortas na área tratada] X 100 (MAPA, 1997).

RESULTADOS E DISCUSSÃO

No teste in vitro o número de moscas – nas tomadas de tempos de dez minutos, trinta minutos, uma hora, duas horas, três horas, doze horas, 24 horas, 36 horas e 48 horas – afetadas por efeito de hiperexcitabilidade após expostas ao produto foi de 11, 56, 66, 81, 87, 98 171, 232 e 311, respectivamente. O número de moscas mortas nas tomadas de tempos citadas acima foi respectivamente de 0, 13, 18, 41, 53, 56, 79, 212, 253 de um total de 330 exemplares expostos ao produto (Tabelas 1 e 2).
O valor encontrado para DL50 em M. domestica foi de 0,2612 mg/cm² com intervalo de confiança (95%) de 0,0078 a 8,7573 mg/cm². Calculou-se a dose com base na tomada de tempo de 36 horas, na qual ocorreu alta taxa de mortalidade no grupo tratado. No grupo testemunha não havia nenhuma mosca morta.
KRISTENSEN & JESPERSEN (2008), em seus experimentos, calcularam a DL50 do tiametoxam, sob forma de iscas, em M. domestica, encontrando o valor de 1,7 μg em cada grama de isca utilizada. Embora, na metodologia utilizada, a forma de apresentação do produto ser diferente, cabe salientar que os resultados obtidos revelam eficácia do tiametoxan sobre M. domestica, corroborando os resultados encontrados no presente trabalho.
Diversos compostos inseticidas, na formulação spray, foram testados para cálculo da DL50, em uma espécie de coleóptero, Agriotres obscurus, dentre eles o neonicotinoide tiametoxam. Para este inseticida, o valor encontrado neste inseto foi de 0,17 %, correspondendo a 1,7 mg em cada mililitro de produto (VAN-HERK et al., 2008). Apesar de se tratar de um inseto diferente, é apreciável se considerar que pertencem à mesma Classe, Insecta, portanto, apresentam fisiologia semelhante. Diante disso, assim como no presente trabalho, é mais uma vez comprovada a eficácia do tiametoxam em insetos.
No ambiente controlado, expondo duzentas moscas à isca com ativo, o total de moscas mortas foi de 38, no período de duas horas (Tabela 3). No teste efetuado em campo, o número de moscas mortas foi de 254 exemplares, com registros de temperatura durante o período variando de 26 a 27°C e umidade relativa de 80% (Tabela 4). Observou-se que, nas posições em que as iscas ficavam em área com maior iluminação, ocorreu maior taxa de mortalidade. Trata-se de resultado que reforça a recomendação do MAPA quanto à mudança de posições entre o grupo-controle e o grupo-tratado.
A eficácia das iscas utilizadas no ambiente controlado e em campo foi respectivamente de 94,74 % e 98,03%. A recomendação do MAPA (1997) é que a eficácia mínima seja de 80% para produtos mosquicidas.
õe à proliferação de populações de diversos insetos, inclusive M. domestica. Existem poucos estudos empregando-se o tiametoxam no controle deste díptero, que tantos prejuízos provocam à saúde de homens e animais. Os resultados obtidos poderão contribuir com o sucesso do seu controle, proporcionando bem-estar e melhores condições de saúde, uma vez que as moscas são responsáveis pela veiculação de diversos patógenos.

CONCLUSÃO

A isca utilizada de tiametoxan nos ensaios foi eficaz no controle de M. domestica tanto em ambiente controlado quanto em nível de campo.
A determinação da DL50 para M. domestica, com o tiametoxam, utilizando-se papel-filtro impregnado com este composto, possibilitará o monitoramento periódico de possível desenvolvimento de focos de resistência da mosca doméstica a esta nova classe dos neonicotinoides.

REFERÊNCIAS

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Protocolado em: 13 mar. 2009. Aceito em: 15 abr. 2010.