Introdução

A avicultura surgiu como atividade industrial no Brasil na década de 1960, com a importação dos primeiros lotes de matrizes⁽¹⁾, destinadas à produção de frangos de corte e à produção de ovos – as matrizes pesadas e de postura, respectivamente. As galinhas da linhagem comercial Ross 308 AP (AP95) são matrizes pesadas, geneticamente melhoradas para ganho de peso.
Desde então, numerosos trabalhos investigativos, nas diversas áreas do conhecimento, à procura de melhores condições de criação e de resultados produtivos crescentes, têm sido realizados. Técnicas de manejos sanitários, nutricionais e de criação propriamente dita, associadas aos avanços na área genética, aliam-se às pesquisas em saúde animal, fisiologia e morfologia para potencializar os resultados.
A exploração zootécnica impulsiona a intensa seleção genética, com o objetivo de desenvolver animais com maior produtividade e rusticidade, ou seja, capazes de produzirem bem, mesmo quando submetidos a condições adversas. Portanto, as adaptações morfofisiológicas são essenciais para o desenvolvimento de linhagens de aves mais resistentes. Tais adaptações geram variações anatômicas e, por conseguinte, justificam as diversas pesquisas morfológicas⁽²⁾; dentre elas, aquelas referentes aos órgãos ligados à defesa do organismo, por exemplo, o timo, importante órgão linfoide, cujo estudo é prioridade em diversos grupos de pesquisas em aves.
O timo é um órgão epitelial derivado da terceira bolsa faríngea, apresenta-se formado por lobos contendo grupos frouxos de células epiteliais e cobertos por cápsula de tecido conjuntivo. Este órgão é de suma importância nas aves e mamíferos e, por ser colonizado por linfócitos timodependentes, torna-se o principal local de produção destas células^(3,4).
Em aves é um órgão par, composto por vários lobos separados por tecido linfoide, situado no pescoço, próximo à veia jugular externa e ao nervo vago e é mais ativo em aves jovens e regride com a maturidade sexual⁽⁵⁾.
No timo, os linfócitos são diferenciados a partir de células tronco linfoides e, em seguida, tornam-se imunocompetentes⁽⁶⁾. Considerando o alto grau de exigência fisiológica a que as aves de produção são submetidas, a manutenção da integridade da saúde dos plantéis é condição fundamental para alcançar os índices de produtividade desejados.
Além disso, o timo das aves permanece ativo por um período maior que nos mamíferos, entretanto, as informações sobre as mudanças que ocorrem nesse órgão, relacionadas à idade das aves, são escassas, fragmentadas e heterogêneas(7). Tais argumentos fundamentam o aprofundamento do estudo anatômico do timo.
Assim sendo, objetivou-se fornecer dados referentes às características anatômicas do timo, especificamente sobre a sua topografia e morfometria em aves domésticas (Gallus gallus domesticus) da linhagem Ross 308 AP (AP95).

Material e métodos

O projeto foi aprovado pelo comitê de ética na utilização de animais da Universidade de Rio Verde – Goiás e obteve o parecer favorável com o protocolo CEUA/UniRV N° 012/16.
Foram utilizados 30 reprodutores de aves domésticas (Gallus gallus domesticus), 15 fêmeas e 15 machos da linhagem Ross 308 AP (AP95), com idade de 14 a 16 semanas, com média de massa corporal de 2,1 kg para machos e 1,7 kg para fêmeas. Os espécimes foram disponibilizados, depois de constatada a morte natural e descartada a possibilidade de doença infecciosa, por uma granja comercial de reprodutoras pesadas situada no município de Uberlândia – Minas Gerais.
A massa corporal de cada animal foi determinada com o uso de uma balança eletrônica (Digitron®, Zona Franca de Manaus, Brasil). Em seguida, os exemplares foram congelados e enviados ao laboratório de anatomia dos animais domésticos da Universidade Federal de Uberlândia (UFU). Neste local, após o descongelamento total em água corrente, foi realizada a fixação de cada exemplar em solução aquosa de formol a 10% (Labsynth – Produtos para Laboratório Ltda, São Paulo, Brasil), por meio de injeção subcutânea, intramuscular profunda e intracavitária. Logo em seguida, as peças foram imersas e mantidas em igual solução, onde permaneceram conservadas para posterior dissecação.
Em cada ave, descreveu-se a localização do timo e sua sintopia e, em seguida, o comprimento total do pescoço foi determinado, tendo como referência os ossos atlas, cranialmente e clavículas, caudalmente. Logo após, as regiões cranial, média e caudal do pescoço foram delimitadas para, então, realizar a contagem dos lobos tímicos por região e em cada antímero. Posteriormente, obteve-se a morfometria do órgão, precisando-se o comprimento (eixo longitudinal), a largura (eixo laterolateral) e a espessura (eixo dorsoventral) de cada lobo tímico. Todas as mensurações foram realizadas com o auxílio de paquímetro digital (Starret Indústria e Comércio Ltda, São Paulo, Brasil).
Após a dissecação, para identificação histológica, coletaram-se fragmentos do órgão que foram fixados em formol a 10% e encaminhados ao laboratório de Patologia da UFU, onde se sucedeu o processamento do material de acordo com o protocolo de rotina de inclusão em parafina. Confeccionaram-se lâminas histológicas com dois cortes de cada amostra, as quais foram coradas pela técnica usual para hematoxilina-eosina (HE) para que fossem observadas ao microscópio óptico com lentes objetivas de 10x e 40x. As imagens das lâminas foram digitalizadas em microscópio Leica DM500 acoplado à câmera Leica ICC50, ligada a um computador PC contendo o software para captura e análise de imagem Leica LAS EZ.
Tabularam-se os dados obtidos e realizaram-se as análises estatísticas por meio do programa Biostat 5.3. Após averiguação da normalidade e das variâncias, empregaram-se os testes de Mann-Whitney para amostras independentes e de Wilcoxon para amostras relacionadas. Para comparações das medidas dos pescoços e dos lobos tímicos, do número de aves e do número de lobos, entre os sexos e para cada antímero e região cervical, utilizou-se o Teste de Mann-Whitney. Para confrontar os dados obtidos em relação ao número e às mensurações dos lobos tímicos, em cada sexo e região do pescoço entre os antímeros, aplicou-se o teste de Wilcoxon. Todos os testes tiveram nível de significância (α) de 5% e confiança (1 - α) de 95%(8,9).
Fotografaram-se as estruturas em questão e a nomenclatura utilizada foi pautada na Nomina Anatomica Avium⁽¹⁰⁾.

Resultados

As análises dos cortes histológicos permitiram evidenciar que o parênquima do timo das aves AP95 divide-se em córtex e medula, com estruturas bem definidas, sendo possível identificar os corpúsculos tímicos na região medular (Figuras 1 e 2).

Os lobos tímicos foram identificados, em ambos os antímeros, na região ventrolateral do pescoço e estendiam-se desde a região cervical cranial até o limite cranial da cavidade toracoabdominal. Tinham coloração rosa claro e formatos variados, alongados, ovalados e triangulares, sendo que a maioria apresentou forma alongada no sentido craniocaudal (Figura 3).
Topograficamente, os timos direito e esquerdo posicionavam-se lateral e paralelamente ao feixe vásculo-nervoso, que contém o nervo vago, a veia jugular externa e a artéria comum do nervo vago, (Figura 3). No antímero direito, os lobos tímicos relacionavam-se caudalmente com a glândula tireoide e ventralmente com o esôfago e o inglúvio (Figura 3-AD). No antímero contralateral, a face medial dos lobos, nos terços cranial e médio do pescoço estava em contato com a musculatura cervical e no terço distal com a face lateral esquerda da traqueia, caudalmente localizava-se a glândula tireoide esquerda (Figura 3-AE).
O pescoço das aves apresentou comprimento total médio de 13,77 cm e 13,87 cm para fêmeas e machos, respectivamente (Tabela 1).

O número de lobos tímicos variou de quatro a oito, sendo quatro o mais frequente em fêmeas e cinco o mais frequente em machos, tanto no antímero direito como no esquerdo. Uma fêmea (6,66%) apresentou oito lobos no antímero esquerdo (Tabela 2 e 3).

Em relação ao número de lobos tímicos, a região média do pescoço apresentou a maior e a região cranial exibiu a menor média, nos antímeros direito e esquerdo e em ambos os sexos. Em fêmeas, observou-se uma maior média no timo esquerdo e em machos, no direito (Tabela 4).

As medidas médias das dimensões dos lobos tímicos de ambos os antímeros indicaram diferenças significativas entre machos e fêmeas na região caudal do pescoço. Nos antímeros direito e esquerdo, as diferenças foram observadas em relação à largura e à espessura, além disso, no esquerdo constatou-se também quanto ao comprimento (Tabelas 5 e 6).

Levando-se em consideração as regiões do pescoço, comparou-se as médias de cada dimensão dos lobos entre os antímeros direito e esquerdo, em aves do mesmo sexo. Em fêmeas, detectaram-se diferenças quanto à largura e espessura, nas regiões cervicais média e cranial, respectivamente. Nos machos, foram notadas na região caudal, em relação ao comprimento (Tabelas 7 e 8).

Discussão

A análise dos cortes histológicos dos lobos tímicos mostrou que as regiões cortical e a medular do órgão encontram-se nítidas, sendo que, na medula, notou-se o corpúsculo tímico, o que é condizente com o que foi relatado por Nickel et al.⁽¹¹⁾, Bódi et al.⁽¹²⁾ e Kannan et al.⁽¹³⁾.
Os lobos tímicos apresentaram formatos variados, desde ovalados, triangulares e alongados no sentido craniocaudal, com coloração rosa claro, assim como foi descrito por Nickel et al. e Getty^(11,20). Dispunham-se ventrolateralmente, de forma linear longitudinal, estendendo-se desde a região cranial do pescoço até o limite cranial da cavidade toracoabdominal, ao nível das clavículas. Havia estreita relação dos lobos, direitos e esquerdos, com o feixe vásculo-nervoso (nervo vago, veia jugular externa e artéria comum do nervo vago) correspondente, ao qual se posicionava lateral e paralelamente. Tais achados vão ao encontro dos de Pereira, Baumel, Nickel et al., Pereira, Santana et al., Santana et al.^{(2,10,11,14-26)}. No antímero direito, os lobos tímicos se relacionavam caudalmente com a glândula tireoide e ventralmente com o esôfago e o inglúvio. No outro antímero, a face medial dos lobos estava em contato com a musculatura cervical, nos terços cranial e médio do pescoço e no terço distal com a face lateral esquerda da traqueia^(9,11,14-25).
Os pescoços apresentaram comprimentos médios de 13,77 cm e 13,87 cm, respectivamente, em fêmeas e machos, não havendo diferença entre os sexos. Nickel et al.⁽¹¹⁾ relataram que esses valores corroboram com os valores do tamanho do timo de galinhas que atingem o máximo desenvolvimento entre 4 e 17 semanas. Esse dado não foi observado nos trabalhos realizados com outras aves domésticas, no entanto, tratou-se de um dado relevante no presente estudo, já que foi referência para a determinação das regiões cervicais e posterior contagem do número de lobos tímicos^(11,14-26).
Tomando-se como base o comprimento total do pescoço de cada ave e subdividindo-o em três regiões (cranial, média e caudal) de tamanhos iguais, verificou-se que a ocorrência de lobos tímicos no terço mais cranial é menor, quando comparada aos terços médio e caudal⁽²⁰⁾.
As aves apresentaram de quatro a oito lobos tímicos individualizados, independente do antímero e sexo^(19,20), diferindo do número de seis a oito, citado por alguns autores^(11,20,27), sendo que os lobos completamente individualizados não ocorrem em aves jovens^(11,20).
Em aves da linhagem Bovans Goldline, descreveu-se de dois a seis, com predomínio de cinco e três lobos, para os antímeros direito e esquerdo, respectivamente⁽²⁴⁾; nas aves Paraíso Pedrês, o número variou de dois a 10 lobos para o antímero esquerdo e de três a oito lobos para o antímero direito, não ocorrendo diferença estatística significante para os dados correlacionados entre machos e fêmeas⁽¹⁷⁾; em Hubbard, o número de lobos oscilou de três a treze⁽¹⁴⁾; para aves Master Gris Cou Plumé encontrou-se de quatro a 11 lobos tímicos, por antímero⁽²⁵⁾; uma variação de três a cinco lobos foi constatada em aves reprodutoras pesadas Cobb, com idades entre cinco e seis semanas⁽²³⁾. Por fim, em galinhas caipiras, o número de lobos tímicos descritos foi de quatro a oito por antímero⁽²⁶⁾, os dados obtidos no presente estudo corroboram com estes últimos dados.
O número de lobos tímicos foi maior no antímero direito do que no esquerdo, independente do sexo⁽²⁴⁾, entretanto, pode ser menor⁽²³⁾. Porém, os dados encontrados para as aves desta pesquisa, mostraram que as médias para os antímeros direito e esquerdo, respectivamente, são 4,87 e 5,13 em fêmeas e 5,47 e 5,13 em machos, não se verificando diferenças entre os antímeros, tampouco entre os sexos.
Em relação às dimensões, nas fêmeas, somente a espessura dos lobos localizados no terço cranial do antímero esquerdo apresentou-se maior que os localizados no direito e, naqueles da região média esquerda, a largura foi superior ao antímero oposto. Nos machos, a média do comprimento dos lobos localizados no terço caudal esquerdo foi maior do que no antímero direito e as demais medidas não se diferenciaram.
Em aves jovens, as medidas dos lobos tímicos variaram de 8 a 15 mm de comprimento, 7 a 9 mm de largura e de 2 a 5 mm de espessura⁽¹¹⁾. Em galinhas da linhagem Paraíso Pedrês, de 11 semanas de idade, os lobos mediram em média 5,4 mm de largura, 12,4 mm de comprimento e 0,23 mm de espessura, em ambos os antímeros, não havendo diferença estatística para os dados correlacionados entre machos e fêmeas⁽¹⁷⁾. Tais dados diferem dos encontrados neste estudo, pois foram detectados valores maiores nas larguras e espessuras, dos lobos situados no terço cervical caudal de machos em relação às fêmeas.

Conclusão

O timo das aves AP95 apresentou características topográficas e morfológicas similares àquelas de outras linhagens, porém, quanto à morfometria, foram observadas características singulares.

Referências