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INTRODUÇÃO

A inseminação artificial (IA) em suínos é uma biotécnica eficiente, de fácil execução e de baixo custo (VAZQUEZ et al., 2008), que vem sendo usada de forma crescente, em função dos benefícios genéticos, econômicos e sanitários (DESCHAMPS et al., 1988; CORRÊA et al., 2001). Estimativas recentes indicam que, pelo menos, 50% das fêmeas alojadas em sistemas tecnificados de produção são inseminadas artificialmente (BORTOLOZZO & WENTZ, 2005). Portanto, os protocolos utilizados nas IA podem ter impacto sobre a eficiência reprodutiva destes sistemas.
A realização da IA no período entre 28 horas antes da ovulação até, no máximo, 8 horas após a ovulação está associada à obtenção de índices satisfatórios de desempenho reprodutivo (KEMP & SOEDE, 1996; NISSEN et al., 1997; BORTOLOZZO et al., 2005). Dessa forma, a determinação do momento de ovulação é fundamental para o sucesso de programas de IA. Em geral, a ovulação da fêmea suína ocorre no início do terço final do estro (WEITZE et al., 1994; CASSAR et al, 2005; ALVARENGA et al., 2006), cuja duração é bastante variável e relativamente longa, entre 48 e 62 horas (WEITZE et al., 1994; NISSEN et al., 1997; LUCIA et al., 1999). A duração do estro pode ser estimada em função do intervalo desmame-estro (IDE), se for considerado que fêmeas com IDE mais curto tendem a permanecer em estro por mais tempo (WEITZE et al., 1994; KEMP & SOEDE, 1996). Porém, como esta associação é pouco consistente, estimativas do momento de ocorrência da ovulação, baseadas apenas nessa associação negativa entre a duração do estro e o IDE, são pouco precisas (LUCIA et al., 1999; CORRÊA et al., 2002; ALVARENGA et al., 2006). Com o uso de ultrassonografia, o diagnóstico da ovulação pode ser feito com maior precisão (WEITZE et al., 1994; KEMP & SOEDE, 1996; NISSEN et al., 1997; VIANA et al., 1999; ALVARENGA et al., 2006), mas o seu uso como rotina ainda é limitado, pois o equipamento tem alto custo e seu manuseio exige treinamento especializado.
Em granjas comerciais, é comum o uso de múltiplas IA por estro (FOXCROFT et al., 2008; VAZQUEZ et al., 2008). Isso pode ocorrer em função da longa duração do estro, como forma de compensar a imprecisão na estimativa do momento da ovulação. Em geral, os protocolos de IA usados em granjas comerciais utilizam duas a três IA durante o estro, cada uma com um total de espermatozoides entre 2,5 e 3,0 x109 (JOHNSON, 2000; CORRÊA et al., 2001; RATH, 2002; BORTOLOZZO & WENTZ, 2005). Ainda que a realização de um menor número de IA durante o estro possa ser de interesse para sistemas de produção de suínos (BORTOLOZZO et al., 2005; FOXCROFT et al., 2008), para otimizar o uso dos machos e reduzir custos, em algumas granjas comerciais, as fêmeas são inseminadas consecutivamente, enquanto apresentarem sinais de estro, sendo, muitas vezes, inseminadas mais do que três vezes durante esse período. Este estudo avaliou a associação entre o número de IA realizadas durante o estro com o perfil estral das fêmeas e o seu desempenho reprodutivo subsequente.

MATERIAL E MÉTODOS

Este estudo foi realizado em uma granja comercial, localizada na região noroeste do estado do Rio Grande do Sul, com um plantel formado por 2.250 matrizes de uma mesma base genética. De cada grupo semanal de desmame, metade das fêmeas desmamadas foi selecionada ao acaso. Não se avaliaram as fêmeas que apresentaram estro no momento do desmame ou que não apresentaram estro em até dez dias após o desmame e excluíram-se do estudo aquelas que foram subsequentemente descartadas por problemas não reprodutivos. O estudo seguiu um delineamento observacional, sendo a colheita de dados realizada sem interferência no manejo conduzido na granja. A partir do desmame, foram iniciadas as avaliações do perfil estral e da dinâmica folicular, por duas equipes que trabalharam simultaneamente, ainda que cada equipe não tivesse conhecimento dos dados colhidos pela outra. Baseou-se a detecção do estro na observação do reflexo de tolerância ao homem, na presença de um macho sexualmente maduro (RTHM), em três turnos (às 6:30, 14:30 e 22:30 h). Os machos foram conduzidos por um técnico treinado, pelo corredor entre as fileiras das gaiolas individuais, em frente às fêmeas. Caracterizaram-se o início do estro pelo primeiro RTHM positivo e o final do estro pelo primeiro RTHM negativo. O IDE foi calculado como o intervalo entre o desmame e o início do estro e a duração do estro foi calculada pelo intervalo entre o início e o final do estro (WEITZE et al., 1994; LUCIA et al., 1999; VIANA et al., 1999).
Avaliou-se a dinâmica folicular através da ultrassonografia em tempo real, pela técnica transcutânea, com transdutor convexo de 5,0 MHz, (Anser Vet 485, Pie Medical®) (SOEDE & KEMP, 1993; ALVARENGA et al., 2006). Procedeu-se ao exame das fêmeas em pé, duas vezes ao dia (às 6:30 e 14:30 h). No momento do exame, foi utilizado o gel carboxi-metilcelulose, na superfície de contato do transdutor, para garantir a propagação do som. Posicionou-se o transdutor no flanco direito, no ponto médio entre a articulação femurotibial-patelar e a última costela, 10 cm acima do úbere. Como pontos de referência para a localização do ovário, foram considerados a bexiga, na posição caudal, e as alças intestinais, na posição cranial. Definiu-se o momento da ovulação pela ausência de folículos pré-ovulatórios, ou quando o número de folículos era menor do que o encontrado no exame anterior, desde que estes achados fossem confirmados no exame no turno seguinte, a fim de evitar diagnósticos falsos-positivos.
As IA foram realizadas de acordo com os protocolos de detecção do estro rotineiramente conduzidos pela equipe de trabalho da granja, com detecção do estro baseada na observação do RTHM, duas vezes ao dia (às 8:00 e 16:30 h). Durante o período de avaliação, 168 fêmeas foram inseminadas, com doses de sêmen com volume de 100 mL e 3 x 109 espermatozoides, diluídas em Beltsville Thawing Solution (BTS) (PURSEL & JOHNSON, 1975) e usadas no máximo 48 horas após a coleta. Realizou-se a primeira IA no momento do diagnóstico do estro (0 h), e as demais IA foram feitas em intervalos de 12 horas, até que as fêmeas deixassem de apresentar sinais de cio. O número de IA realizadas durante o estro foi registrado. A taxa de parição foi calculada pela divisão do número de partos pelo número total de fêmeas inseminadas. Extraiu-se o número total de leitões nascidos no parto subsequente do banco de dados da granja. Uma vez que o número máximo de IA por estro observado neste estudo foi igual a seis, agruparam-se as fêmeas que receberam mais de três IA em uma única categoria (quatro a seis IA).
Avaliou-se a associação entre o tamanho da leitegada e o número de IA por análise de variância, com comparação entre médias através do método da diferença mínima significativa (LSD). A associação entre a taxa de parição e o número de IA foi avaliada através do teste de qui-quadrado. Realizou-se uma análise de regressão logística para avaliar a associação entre o número de IA durante o estro e a duração do estro das fêmeas, considerando como controles as fêmeas que receberam duas ou três IA durante o estro e nos casos em que as fêmeas receberam entre quatro e seis IA. Categorizou-se a duração do estro em: < 50 horas; 50 a 74 horas; e > 78 horas. O risco de fêmeas classificadas em diferentes categoria de duração do estro serem submetidas entre quatro e seis IA durante o estro foi estimado pela Razão de Chance, determinando-se a respectiva significância estatística através de intervalos de confiança, em nível de significância de 95%, e pelo teste de qui-quadrado. Todas as análises estatísticas foram geradas pelo programa Statistix® (2003).

RESULTADOS E DISCUSSÃO

As fêmeas avaliadas neste estudo apresentaram ordem de parto igual a 3,3 ± 2,7, com taxa de parição de 80,4% e tamanho total da leitegada igual a 11,8 ± 3,3. O efeito da ordem de parto sobre a taxa de parição e o tamanho da leitegada não foi significativo (p > 0,05). Ainda que a média para o tamanho da leitegada estivesse dentro dos níveis desejáveis, a taxa de parição observada esteve abaixo dos índices aceitáveis na suinocultura moderna (DIAL et al., 1992). Mais da metade das fêmeas inseminadas recebeu três IA por estro (Tabela 1), apresentando taxa de parição inferior (p < 0,05) à observada nas fêmeas que receberam duas IA (77,5% e 92,0%, respectivamente). Em um estudo incluindo apenas leitoas, o uso de uma única IA por estro foi associada com redução no tamanho total da leitegada, em comparação com o uso de duas IA por estro, ainda que não tenham sido observados efeitos nas taxas de parição (BORTOLOZZO et al., 2005). A vantagem na taxa de parição observada no presente estudo pode ser considerada discutível, em função da substancial desvantagem numérica entre o tamanho da leitegada dessas fêmeas (10,6) e o das fêmeas inseminadas três ou mais vezes (12,0). Por exemplo, considerando a taxa de parição e o tamanho total da leitegada observados neste estudo, as 25 fêmeas com duas IA por estro teriam produzido 244 leitões. Porém, se com a mesma taxa de parição o tamanho total da leitegada fosse igual ao observado para as fêmeas com 3 IA por estro, estas teriam produzido 276 leitões (ou seja, 32 leitões a mais). Portanto, ainda que a diferença observada não tenha sido significativa, esta seria relevante em condições de campo. A ausência de significância estatística pode se dever ao número relativamente pequeno de fêmeas avaliadas, o que se justifica pelo modelo observacional deste estudo. Ainda que fosse aconselhável sob o ponto de vista estatístico, a avaliação de um maior número de fêmeas foi limitada, pela carência de recursos humanos para a sua realização, dentro dos intervalos de tempo propostos para as avaliações.
Menos de 15% das fêmeas avaliadas receberam duas IA por estro, o que sugere que, na granja em questão, o número de IA por estro é proporcional à duração do estro, pois as fêmeas que permaneceram em estro por mais tempo foram inseminadas mais vezes (Tabela 2). Neste contexto, as fêmeas com duas IA por estro seriam as que não apresentaram estro longo o suficiente para serem inseminadas, ao menos, uma terceira vez. A realização das avaliações por ultrassonografia em intervalos mais curtos permitiria uma maior precisão na determinação do momento da ovulação, porém, em função da carência de recursos humanos, já mencionada antes, a condução dessas avaliações em intervalos menores somente seria possível quebrando a independência das duas equipes envolvidas no estudo, o que prejudicaria a metodologia estabelecida. Ainda assim, o momento da ovulação observado neste estudo (Tabela 2) é consistente com as estimativas obtidas com avaliações dentro de intervalos mais curtos (KEMP & SOEDE, 1996).
No entanto, mais de 30% das fêmeas foram inseminadas quatro ou mais vezes durante o estro (Tabela 1), apresentando taxa de parição e tamanho da leitegada semelhantes aos das fêmeas inseminadas três vezes (p > 0,05). Portanto, o uso de mais do que três IA durante o estro não trouxe benefício em termos de desempenho reprodutivo, apenas contribuindo para o aumento dos custos por fêmea inseminada. De certa forma, estes resultados são consistentes com estudos desenvolvidos com monta natural (XUE et al., 1998a; XUE et al., 1998b), que relatam desempenho reprodutivo semelhante com três ou apenas dois acasalamentos por estro, ainda que, no estudo em questão, o número de acasalamentos por fêmeas tenha sido alocado ao acaso, e não em função da duração do estro. O aparente benefício em tamanho de leitegada observado para as fêmeas com três ou quatro a seis IA por estro, em comparação com aquelas com duas IA por estro, não pode ser considerado relevante, em função da baixa taxa de parição observada nas duas categorias. Para as fêmeas que receberam três IA por estro, a menor taxa de parição poder ser decorrente do protocolo usado para a IA, pois, com a primeira IA ocorrendo no momento da detecção do estro e as demais em intervalos de 12 horas, a terceira IA ocorreria 24 horas após a detecção do estro. Considerando que as fêmeas que receberam três IA durante o estro ovularam em torno de 45 horas após a detecção do estro (Tabela 2) e que a ovulação ocorre no terço final do estro, independentemente da duração do estro (KEMP & SOEDE, 1996; NISSEN et al., 1997; CORRÊA et al., 2002), é possível que um protocolo diferente, com a realização da primeira IA 12 horas após a detecção do estro, fosse mais bem sincronizado com a ovulação, o que, provavelmente, seria benéfico para o desempenho reprodutivo, considerando o tamanho total da leitegada observado para as fêmeas que receberam três IA por estro. É importante ressaltar que, dada sua natureza observacional, as informações referentes à detecção de estro e dinâmica folicular colhidas pelas equipes que atuaram no presente estudo não eram de conhecimento da equipe da granja, que realizou as IA de acordo com protocolos previamente determinados para sua rotina de trabalho.
O estro das fêmeas que receberam quatro a seis IA foi mais longo do que o estro das fêmeas inseminadas menos vezes (Tabela 2). As médias observadas para o IDE, a duração do estro e o momento da ovulação foram consistentes com outros estudos (SOEDE & KEMP, 1993; WEITZE et al., 1994; KEMP & SOEDE, 1996; LUCIA et al., 1999; VIANA et al., 1999). O IDE foi mais longo nas fêmeas inseminadas duas vezes, as quais também apresentaram estro mais curto. Porém, embora o número de IA por estro tenha sido maior, na medida em que o estro foi mais longo, o IDE não diferiu para fêmeas inseminadas três ou quatro a seis vezes por estro (p > 0,05). Esses dados confirmam que, a despeito de existir uma associação negativa entre o IDE e duração do estro (WEITZE et al., 1994; KEMP & SOEDE, 1996), esta apresenta limitada intensidade e, portanto, não pode ser utilizada de forma precisa para estimar o momento de ocorrência da ovulação (LUCIA et al., 1999; CORRÊA et al., 2002; ALVARENGA et al., 2006).
Para as fêmeas com duração do estro superior a 78 horas, o risco de receberem quatro ou mais IA por estro foi 6,1 vezes maior (P = 0,0003) do que para as fêmeas com duração do estro inferior a 50 horas, e 3,4 vezes maior (P = 0,0028) do que para as fêmeas com duração do estro entre 50 a 74 horas (Tabela 3), ainda que este risco tenha sido semelhante (p > 0,05) para as fêmeas com duração do estro entre 50 a 74 horas ou inferior a 50 horas. Assim, em função do grande número de IA realizadas nas fêmeas com estro mais longo, é possível que uma ou mais inseminações tenham sido realizadas no metaestro, caso a detecção de estro realizada pela equipe da granja tenha sido deficiente. Nestes casos, poderia ocorrer infiltração leucocitária no sistema genital da fêmea, para eliminar potenciais organismos agressores, como agentes infecciosos ou os espermatozoides presentes no seu interior, o que é associado com maior frequência de processos patológicos, como endometrites e descargas vulvares, que podem ser associados a incremento na taxa de retorno ao estro (ROZEMBOOM et al., 1997, 1999; ALTHOUSE et al., 2000; KAEOKET et al., 2005), o que justificaria a redução na taxa de parição observada nas fêmeas com quatro a seis IA durante o estro.

CONCLUSÕES

Ainda que a longa duração do estro em suínos permita a realização de múltiplas inseminações artificiais por estro, o número de mais que três inseminações por estro não seria recomendado, em função de não se refletir em benefício para a taxa de parição e para o tamanho da leitegada subsequentes.

REFERÊNCIAS

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Protocolado em: 23 out. 2007. Aceito em: 26 jan. 2010.