INOCULAÇÃO DE MALTOSE E/OU SACAROSE EM OVOS LEVES EMBRIONADOS

Rodrigo Afonso Leitão¹, Nadja Susana Mogyca Leandro², José Henrique Stringhini², Marcos Barcellos Café², Maíra Silva Matos³, Maria Auxiliadora Andrade²

¹Professor Doutor do Instituto Federal do Triângulo Mineiro, Uberaba, MG, Brasil

²Professores Doutores da Universidade Federal de Goiás, Goiânia, GO, Brasil. mogyca@ufg.br

³Zootecnista Mestre do Serviço Nacional de Aprendizagem Rural, Goiânia, GO, Brasil.

RESUMO

Foram estudados os parâmetros de incubação, maturidade gastrintestinal e desempenho até 14 dias de pintos de corte oriundos de ovos leves (55,82 ± 1,64g) inoculados com maltose e/ou sacarose, aos 16 dias de incubação. Os tratamentos compreenderam ovos íntegros e ovos suplementados com 0,6 mL de solução de maltose 68 g/L; com maltose 136 g/L; com maltose 204 g/L; com maltose e sacarose (68 g/L + 68 g/L). O delineamento utilizado foi em blocos casualizados com cinco tratamentos e 120 repetições, sendo um ovo a unidade experimental e para desempenho seis repetições e dez aves por parcela. Os dados foram submetidos ao proc glm do SAS e ao teste de Tukey (P<0,05).  A inoculação de carboidratos aumentou os períodos requeridos para bicagem da membrana interna, da casca e para eclosão As suplementações com maltose ou  maltose+sacarose não interferiram na eclodibilidade e no peso do neonato. O nível de 68g/L de maltose proporcionou maior altura de vilo no primeiro dia de vida, entretanto, esse efeito não foi observado com 10 dias de idade. O nível de 204g/L prejudicou o desenvolvimento gastrintestinal de pintos. Ovos leves inoculados com maltose combinada ou não com sacarose não resultam em pintos com maior desempenho na fase inicial.
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PALAVRAS-CHAVE: alimentação in ovo; histomorfometria; incubação; matrizes jovens; pintos leves.

EFFECT OF MALTOSE AND SUCROSE SUPPLEMENTATION ON EMBRYONIC LIGHT EGGS

ABSTRACT

Hatchery parameters, performance of chicks on initial phase (until 14 days) and intestinal maturity of birds from light eggs supplemented with maltose and sucrose were studied. The treatments were as follows: eggs without supplementation; eggs with 0.6 mL of maltose solution (68 g/L); eggs with 0.6mL of maltose solution (136 g/L); eggs with 0.6 mL of maltose solution (204 g/L); and eggs with 0.6 mL of maltose solution (68 g/L) and sucrose (68 g/mL). The supplementation took place on the 16^th day of incubation. The experimental design used was randomized blocks with five treatments and 120 replicates and as for performance we used randomized blocks with four treatments and six replicates and ten birds in each experimental unit. The supplementation did not affect eclodibility, chick weight, and intestinal development of light chicks. Simple or combined maltose egg supplementation did not bring benefits to initial performance of birds.
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KEYWORDS: incubation; in ovo feeding; intestinal biometry; light chicks; young breeders.

 INTRODUÇÃO

A aplicação de nutrientes in ovo para frangos de corte tem sido estudada como alternativa para estimular o desenvolvimento fisiol.[ogico e morfológico. Christensen et al. (1) selecionaram os carboidratos como importante componente para alimentação em ovo devido à importância desse nutriente. Os carboidratos são utilizados como fonte de glicose, o que é crucial para a eclosão (2), quando os estoques de glicogênio diminuem.

De acordo com Tako et al. (3), vários fatores podem limitar o desenvolvimento e a viabilidade dos embriões na fase pré-eclosão e de pintos recém-eclodidos: 1) o conteúdo de nutrientes para o desenvolvimento de tecidos e reservas do embrião; 2) a habilidade do trato gastrintestinal para digerir nutrientes de dietas exógenas ricas em proteínas e carboidratos e 3) a habilidade dos pintos em substituir os nutrientes do saco da gema pelos da dieta no período pós-eclosão.

A suplementação de carboidratos pode disponibilizar mais glicose para completar a eclosão e ou o armazenamento para subsequente desenvolvimento (4). Foye et al. (5) estudaram perus oriundos de ovos inoculados com carboidratos e verificaram maior quantidade de glicogênio no músculo do peito em relação aos valores observados no grupo controle, sem suplementação de carboidratos.

O método de “alimentação precoce” e/ou “alimentação in ovo” pode ajudar a suprir alguma deficiência nutricional dos embriões e possibilitar ao pinto de corte atingir todo o potencial de crescimento (3), principalmente nos primeiros dias de idade, quando há maior crescimento relativo.

A suplementação de nutrientes em ovo também pode estimular o desenvolvimento precoce da estrutura da mucosa do intestino delgado, já que, de acordo com Tarachai e Yamauchi (6), a mucosa intestinal não responde somente ao estímulo físico, mas primeiramente às características químicas dos nutrientes. A suplementação de nutrientes via ovo pode aumentar a capacidade de digestão e de absorção do intestino (7). Em estudo realizado por Tako et al. (3), a suplementação em ovo de solução salina contendo maltose, sacarose e dextrina aumentou a atividade de maltase na borda em escova do intestino delgado e promoveu maior desenvolvimento das vilosidades, a partir de 48 horas após a suplementação (com 17,5 dias de incubação).

O maior desenvolvimento das vilosidades intestinais no final da incubação pode aumentar o aproveitamento dos nutrientes levando a melhores resultados de eclodibilidade (4,8) e desempenho para pintos de corte (4,9). Foi demonstrado que a suplementação de carboidratos em ovo aumenta os níveis de insulina no sangue, o que proporciona maior estímulo à proliferação epitelial do intestino (10).

A produção de pintos com qualidade é um processo complexo e abrangente que envolve muitos fatores. Dentre os aspectos físicos de qualidade do pinto comercializado com um dia, o peso vivo é um fator relevante a se considerar.  Ovos menores e mais leves são características  de lotes de matrizes jovens (11), com menor deposição de albume e gema no ovo durante o processo de formação, o que pode disponibilizar poucos nutrientes para o crescimento do embrião (12). Como o peso do pinto varia de 61,5 a 76% do peso inicial do ovo de origem (13), matrizes jovens produzem pintos menos desenvolvidos e de qualidade inferior, quando são julgados pela mortalidade e desempenho (14,15,16).

Este estudo foi realizado para verificar o efeito da suplementação de carboidratos (maltose combinada ou não com sacarose) em ovos embrionados (16 dias de incubação) sobre a eclobilidade, qualidade do neonato, maturidade intestinal e o desempenho inicial de pintos oriundos de ovos leves, ou seja, de matrizes jovens.

  MATERIAL E MÉTODOS

 A pesquisa foi conduzida na Escola de Veterinária e Zootecnia da Universidade Federal de Goiás no ano de 2008 para verificar os efeitos da inoculação de carboidratos em ovos embrionados nos períodos de incubação e pós-eclosão. No ensaio de incubação, foram utilizados 600 ovos provenientes de matrizes da linhagem Cobb-500, com 29 semanas de idade, e distribuídos em seis incubadoras automáticas da marca Premium Ecológica, com capacidade para 120 ovos cada. As incubadoras foram mantidas com temperatura de 37,5 ºC e 60% de umidade relativa, durante todo o período de incubação. Os ovos foram pesados (peso médio de 55,82 ± 1,64 g), numerados e distribuídos em delineamento em blocos casualizados, com cinco tratamentos e 120 repetições, sendo cada ovo considerado uma parcela e os blocos as incubadoras.

Os tratamentos estudados foram: ovo íntegro (controle); inoculado com 0,6 mL de solução de maltose 68 g/L (506 mOsm/L); inoculado com 0,6 mL de solução de maltose 136 g/L (708 mOsm/L); inoculado com 0,6 mL de solução de maltose 204 g/L (904 mOsm/L); inoculado com 0,6 mL de solução de maltose 68 g/L + sacarose 68 g/L (708 mOsm/L). Nos quatro tratamentos envolvendo inoculação, os carboidratos foram diluídos em solução NaCl-0,9% (solução salina) no momento da inoculação. Foram utilizados ovos íntegros como tratamento controle, pois, de acordo com Leitão et al. (17), não foram constatadas diferenças entre os tratamentos utilizando ovos íntegros e ovos suplementados com água ou solução salina. A inoculação foi realizada via cavidade alantóide, aos 16 dias de incubação (D16). Os ovos ficaram expostos à temperatura média ambiente de 27º C e foram submetidos à ovoscopia aproximadamente 5 minutos, evitando-se lesionar o embrião.

Para a ovoscopia, os ovos brancos foram eliminados. O procedimento foi realizado a cada três horas, iniciando às 456 horas de incubação, o ovo foi acondicionado em saquinho de filó quando era constatada a bicagem da membrana interna, possibilitando a pesagem da casca e do pinto após a eclosão. Por meio do procedimento foram determinadas as seguintes variáveis: a) período da bicagem da membrana interna: número de horas necessárias à ruptura da membrana interna; b) período da bicagem da casca ou membrana externa: número de horas necessárias à ruptura da casca ou membrana externa; c) período da eclosão: número de horas necessárias para o momento em que ocorre a eclosão do ovo; d) período de retirada: horas necessárias para o momento da retirada do pinto do nascedouro (quando o pinto estava seco). Os ovos brancos foram eliminados.

Após a eclosão as seguintes variáveis foram avaliadas: a) frequência da mortalidade embrionária: número de embriões mortos antes e após a suplementação; b) percentagem de eclosão (eclodibilidade): percentual de pintos eclodidos em relação ao número de ovos férteis; c) peso ao nascer (penugem seca); d) relação peso do pinto/peso do ovo: peso do pinto ao nascer expresso como porcentagem do peso do ovo.

Para avaliação do período pós-eclosão, os 300 pintos foram alojados em um galpão de alvenaria dentro de baterias de arame galvanizado, com cinco andares, munidos de comedouros e bebedouros tipo calha. A ração utilizada foi farelada, composta principlamente de milho e farelo de soja, para atender os níveis nutricionais da fase pré-inicial (21,9% PB e 2.950 kcal de EM/kg de ração), de acordo com Rostagno et al. (18). A ração e a água foram fornecidas à vontade durante todo o período. As aves e as rações foram pesadas nos períodos de um a quatro, um a sete, um a dez e um a 14 dias de idade para estudar as variáveis de desempenho, sendo a conversão alimentar corrigida pelo peso dos pintos mortos.

Foi utilizado o delineamento em blocos casualizados (dois blocos, de machos e de fêmeas), com cinco tratamentos, seis repetições e dez aves por parcela experimental. Os tratamentos foram representados pelos pintos oriundos das diferentes suplementações durante o período de incubação.

No primeiro e décimo dia de vida foram estudadas a biometria dos órgãos do trato gastrintestinal (TGI). Para tanto, um pinto por parcela foi pesado, sacrificado pelo deslocamento cervical e o TGI foi coletado para a determinação do peso do pâncreas, do fígado, do resíduo vitelino, do intestino grosso (cecos, cólon e reto) e peso e comprimento do intestino delgado (porção compreendida entre o piloro e a junção íleo-ceco-cólica). Os valores de peso obtidos foram convertidos em porcentagem do peso corporal dos pintos.

Para a histomorfometria intestinal foi colhido, de cada uma das regiões (duodeno, jejuno e íleo), um fragmento de aproximadamente dois centímetros de comprimento, aberto longitudinalmente, estirado em pedaço de isopor, preso em grampos e fixado em solução de formalina neutra tamponada a 10%. Após 24h de fixação, os fragmentos foram transferidos para solução de álcool 70% e, posteriormente, foram corados pelo método de Hematoxilina – Eosina (HE). As medidas morfométricas foram determinadas utilizando-se o programa analisador de imagens Axion Vision 3.0 (Zeiss^®). As imagens das lâminas foram digitalizadas do microscópio óptico de campo claro (Carl Zeiss modelo JENAVAL) para computador. As medidas de altura de vilosidade foram tomadas a partir da sua região basal, coincidente com a porção superior das criptas, até seu ápice, e a profundidade de cripta foi definida como a profundidade da invaginação da cripta com os vilos adjacentes, de acordo com Uni et al. (19). Foram efetuadas seis medidas de altura de vilos e profundidade de criptas por lâmina, totalizando 36 repetições por tratamento.

Os dados foram submetidos à análise de variância com auxílio do sistema de análise estatística (20) e as médias comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. Para os dados de mortalidade embrionária, foi aplicado o teste de qui-quadrado de acordo com Sampaio (21), sendo cada ovo considerado uma repetição. Os dados de mortalidade pós-eclosão e a porcentagem de resíduo vitelino, aos dez dias de idade, foram transformados em Arc seno ((%M / 100) + 0,05)^0,5, sendo M a taxa de mortalidade.

 RESULTADOS E DISCUSSÃO

A suplementação com maltose ou maltose combinada com sacarose proporcionou atraso nos períodos de bicagem interna, externa, eclosão e retirada do nascedouro em relação ao grupo controle.  Para os ovos íntegros, o tempo necessário para o período de eclosão e o período da retirada da incubadora foi inferior aos demais tratamentos (Tabela 1). Resultados semelhantes foram observados por Leitão et al. (17), sendo que os ovos inoculados aos 16 dias de incubação com glicose (em solução aquosa ou salina) dispenderam mais tempo para a bicagem da membrana interna, da casca e para eclosão em relação aos embriões não suplementados.

A suplementação de maltose, associada ou não à sacarose, não interferiu (P>0,05) na mortalidade embrionária, assim como não influenciou a eclodibilidade (Tabela 2). Pode-se observar que os ovos íntegros apresentaram menor período de eclosão e retirada dos pintos do nascedouro (p<0,05). O atraso observado nos ovos inoculados pode estar relacionado à retirada dos ovos da incubadora no período da inoculação, o que pode ter causado uma redução na temperatura dos ovos, ou mesmo o fato de a solução ter sido injetada em temperatura ambiente, ou seja, abaixo da temperatura do ovo.

O resultado de eclodibilidade corrobora com Uni et al. (9) que, suplementando ovos embrionados com solução contendo maltose, sacarose, dextrina e β-hidroxi-β-metilbutirato, não verificaram aumento na eclodibilidade dos ovos suplementados. No entanto, alguns trabalhos têm demonstrado que a suplementação de ovos com aminoácidos (22) ou com carboidratos (maltose, sacarose e dextrina) (4) proporcionou resultados positivos na eclodibilidade e ou qualidade de pinto.

A mortalidade embrionária não foi afetada, mesmo no tratamento com maltose a 204 g/L com concentração de 904 mOsm/L, ou seja, acima de 800 mOsm/L, concentração máxima para soluções a serem inoculadas em ovo de acordo com a recomendação de Uni e Ferket (4). No entanto, (17) verificaram aumento na mortalidade embrionária em embriões suplementados aos 16 dias de incubação com  glicose numa concentração de 926 mOsm/L.

A suplementação com maltose 136g/L proporcionou maior (P<0,05) relação peso do pinto/peso do ovo quando comparada aos ovos íntegros (Tabela 3). Esse resultado não concorda com os dados de Pedroso et al. (23) que, suplementando diferentes níveis de glicose em ovo, não encontraram diferenças para relação peso do pinto/peso do ovo em relação ao grupo não suplementado. As diferenças nos resultados podem estar relacionadas com o tipo de carboidrato utilizado na suplementação dos embriões aos 16 dias de idade.

Não houve efeito (P>0,05) da suplementação da maltose ou maltose associada com sacarose sobre o peso do pinto ao nascer (Tabela 3). No entanto, Uni et al. (9) encontraram maior peso ao nascer para pintos oriundos de ovos suplementandos com solução contendo maltose, sacarose, dextrina e β-hidroxi-β-metilbutirato. Também Leitão et al. (24) encontraram maiores pesos ao nascer dos pintos oriundos de ovos suplementados com maltose, sacarose ou glicose em relação aos pintos provenientes de ovos íntegros. Esses resultos sugerem que a dosagem de 136g/L de maltose foi melhor.

Não houve efeito da suplementação dos ovos (P>0,05) sobre o desempenho nas diferentes idades estudadas (Tabela 4). Houve perda de peso dos pintos no período da retirada da máquina de eclosão até o momento de alojamento, para todos os tratamentos, o que era esperado. Embora a suplementação de maltose a 136g/L tenha proporcionado melhor relação pinto/ovo, a suplementação não proporcionou ganho no desempenho na fase pré-inicial de criação. Do mesmo modo, Foye et al. (5) constataram maior peso ao nascer de pintos oriundos de ovos inoculados com maltose e dextrina, entretanto esta superioridade não se manteve a partir de três dias de vida.

Pintos poderiam alcançar melhor desempenho se fosse utilizado uma combinação de carboidratos para suplementação em ovo (4). Uni e Ferket (4) estudaram três carboidratos combinados (maltose, sacarose e dextrina) e, em outras pesquisas (9, 3), combinaram maltose, sacarose, dextrina e β-hidroxi-β-metilbutirato e, em todos os estudos, observaram melhor desempenho dos pintos oriundos de ovos suplementados. A mistura de β-hidroxi-β-metilbutirato com carboidratos elevou os níveis da atividade de sacarase e estimulou a proliferação de enterócitos, promovendo maior aproveitamento dos nutrientes e, consequentemente, melhor desempenho (3).

Não foram encontradas diferenças (P>0,05) entre os tratamentos para biometria dos órgãos do trato gastrintestinal dos pintos com um e dez dias de vida (Tabela 5), ou seja, as suplementações realizadas não estimularam o aumento do peso dos órgãos analisados.

Esses dados corroboram com Pedroso et al. (23), que suplementaram ovos com diferentes níveis de glicose (100, 200 e 300 mg) no 16º dia de incubação e não encontraram influência da glicose suplementada no desenvolvimento desses órgãos. Pode-se observar que os valores de coeficientes de variação encontrados para as variáveis de biometria de órgãos foram relativamente elevados, embora esses valores se assemelhem aos coeficientes encontrados por Pedroso et al. (23), e podem ser inerentes à própria variável estudada.

O desenvolvimento dos vilos e criptas foram influenciados pelos tratamentos (P<0,05) em pintos com um dia de idade (Tabela 6), sendo que a suplementação com maltose 68 g/L propiciou maior desenvolvimento dos vilos do duodeno e íleo em relação aos pintos oriundos de ovos não suplementados. Quando foi utilizada maltose 204 g/L, os vilos do jejuno e do íleo apresentaram menor desenvolvimento em relação àqueles dos pintos suplementados com maltose 68 g/L. Na  concentração de 136 g/L de maltose ou  na combinação de maltose  com a sacarose não foi observado efeito positivo. Tako et al. (3) constatou maior comprimento dos vilos do jejuno em pintos com um dia de idade oriundos de ovos suplementados com mistura de carboidratos contendo maltose, sacarose e dextrina aos 17 dias de incubação.

.Aos 10 dias de idade, não foi observado efeito positivo da suplementação com maltose ou maltose associada com sacarose sobre comprimento de vilos, sendo que os melhores resultados foram observados para pintos oriundos de ovos íntegros. As criptas do duodeno dos pintos  oriundos de ovos íntegros mostraram maior desenvolvimento que aquelas de pintos suplementados com maltose 68 g/L e 136 g/L.

De acordo com Tako et al. (3), após a eclosão, acontece rápido desenvolvimento do intestino com o ápice entre o terceiro e o sétimo dia, sendo que, após esse período, essa taxa de crescimento é reduzida. Esses autores afirmaram que o efeito da alimentação em ovo no desenvolvimento morfológico do intestino delgado é máximo até 48 horas após o procedimento de inoculação.

Utilizando ovos de matrizes com 35 semanas ou mais Uni et al. (4), Tako et al. (3) e Uni et al. (9) encontraram resultados favoráveis à suplementação de carboidratos em ovo. As diferenças observadas podem estar relacionadas com muitos fatores, como os carboidratos inoculados, os tipos de associações, dosagens e metodologia de inoculação em ovos utilizada. Embora a suplementação com 68g/L de maltose tenha proporcionado melhor relação peso pinto/peso ovo, os pintos de matrizes jovens (29 semanas) neste trabalho não apresentaram maior peso ao nascer ou melhor desempenho até aos 14 dias de idade.

CONCLUSÕES

As suplementações de maltose ou combinação de maltose com sacarose não melhoraram a taxa de eclosão e a qualidade do pinto neonato, embora a solução com 68g/L da maltose favoreceu o desenvolvimento gastrintestinal de pintos com um dia de idade.

A suplementação aos D16 com maltose combinada ou não com sacarose não proporcionou melhoras no desempenho na fase pré-inicial de criação de pintos leves, oriundos de matrizes jovens.

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Protocolado em: 24 ago. 2008.  Aceito em: 10 set. 2013.