DETECÇÃO RÁPIDA E DIFERENCIAÇÃO DE ESPÉCIES DE MICOBACTÉRIAS POR MEIO DE UM SISTEMA DE PCR MULTIPLEX

Resumo

O gênero

Mycobacterium é constituído por espécies do complexo Mycobacterium tuberculosis e outras denominadas micobactérias não tuberculosas (MNT). Nas infecções causadas por micobactérias, o diagnóstico precoce é essencial para a implementação do tratamento e a cura do paciente. Métodos moleculares têm  proporcionado melhoria considerável da velocidade e precisão na identificação das micobactérias. Este estudo teve como objetivo avaliar um sistema PCR Multiplex em diferentes amostras clínicas de pacientes com tuberculose e micobacterioses, além de cepas de micobactérias isoladas em meio de cultura, para ser proposto como ferramenta auxiliar no diagnóstico diferencial da tuberculose e de doenças causadas por MNT. Foram analisados 40 pacientes com diagnóstico de tuberculose realizado pelo médico assistente do serviço de saúde, dos quais 63,1% eram do sexo masculino e 36,9% do feminino. Foram processados 58 espécimes biológicos de origem pulmonar e extrapulmonar. As amostras clínicas pulmonares bacíliferas, extraídas com Kit QIAamp DNA Mini and Blood Mini Handbook, foram as que amplificaram pelo menos um alvo específico quando foi utilizada a PCR Multiplex. Em relação às características fenotípicas e bioquímicas das 40 cepas de micobactérias, 55% foram caracterizadas como M. tuberculosis, 22,5% como micobactérias não tuberculosas. Quando comparamos os resultados dos testes fenotípicos e bioquímicos com a PCR Multiplex, observamos 93,3% de concordância nos resultados. Na comparação dos resultados da PCR Multiplex com a técnica de PRA- hsp65 e com o diagnóstico final dos pacientes, verificamos que houve concordância de 100% e 74,28% dos resultados, respectivamente. Concluímos que a PCR Multiplex poderá ser utilizada como método auxiliar no diagnóstico diferencial da tuberculose e das infecções causadas por MNT. Entretanto, é de fundamental importância que o diagnóstico diferencial seja baseado na análise conjunta de vários parâmetros que identifiquem as espécies de MNT.